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Techniques de clonage d'ADN par restriction et par recombinaison homologue

Environnement scientifique et technique de la formation

Institut de biologie intégrative de la cellule - UMR 9198

RESPONSABLE

Véronique HENRIOT

Ingénieure d'études

UMR 9198

LIEU

GIF-SUR-YVETTE (91)

ORGANISATION

2 jours
De 4 à 8 stagiaires

COÛT PÉDAGOGIQUE

900 Euros

A L'ISSUE DE LA FORMATION

Evaluation de la formation par les stagiaires
Envoi d'une attestation de formation

DATE DU STAGE

17212 : du jeudi 23/03/2017 au vendredi 24/03/2017

Janvier Février Mars
17212
Avril
Mai Juin Juillet Août
Sept. Oct. Nov. Déc.

OBJECTIFS

- Connaître les principales méthodes de clonage et les éventuelles difficultés pour leur mise en oeuvre
- Actualiser ses connaissances sur les nouvelles stratégies de clonage : clonage rapide par restriction et par recombinaison homologue (SLIC : Sequence and Ligation Independant Cloning, Seamless)
- Maîtriser les méthodologies de clonage classique et par recombinaison homologue

PUBLIC

Techniciens, ingénieurs, chercheurs

PRÉREQUIS

Bonne connaissance de la PCR et des principes du clonage d'ADN. Avoir suivi les formations d'initiation à la biologie moléculaire (Réf. 17132 et 17133, ce catalogue) ou niveau équivalent

PROGRAMME

Cours (4 h)
- Description et comparaison de différentes techniques de clonage : classique (enzymes de restriction conventionnelles), rapide et optimisé (Anza - Invitrogen), recombinaison homologue (SLIC _ Li & Elledge, Nature Methods, 2007 ; Seamless _Thermo Fisher Scientific), gène chimérique
- Problèmes potentiels rencontrés aux différentes étapes du clonage et solutions pour les résoudre

Travaux dirigés (3 h)
- Conception d'oligos, utilisation du logiciel « serial cloner »
- En fin de stage, un moment sera consacré à l'examen de difficultés rencontrées par les stagiaires sur leurs expériences.

Travaux pratiques (9 h)
- Clonage d'un fragment d'ADN dans un vecteur par clonage rapide et SLIC
- Rassemblement de 2 fragments d'ADN dans un vecteur plasmidique par recombinaison homologue

EQUIPEMENT

INTERVENANTS

V. Henriot (ingénieure d'études), C. Chaber et C. Leroy (Thermo Fisher Scientific)

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