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Purification de protéines

Environnement scientifique et technique de la formation

Institut de biologie intégrative de la cellule - UMR 9198

RESPONSABLES

Valérie CAMPANACCI

Ingénieure de recherche

UMR 9198

Mélanie CHENON

Ingénieure d'études

UMR 9198

LIEU

GIF-SUR-YVETTE (91)

ORGANISATION

3,5 jours. Fin du stage le jeudi à 12 h
De 3 à 8 stagiaires
TP en sous-groupes de 4 stagiaires maximum avec un intervenant par sous-groupe

COÛT PÉDAGOGIQUE

1300 Euros

A L'ISSUE DE LA FORMATION

Evaluation de la formation par les stagiaires ; attestation de formation

DATES DU STAGE

17233 : du lundi 15/05/2017 au jeudi 18/05/2017

17238 : du lundi 13/11/2017 au jeudi 16/11/2017

Janvier Février Mars Avril
Mai
17233
Juin Juillet Août
Sept. Oct. Nov.
17238
Déc.

OBJECTIFS

- Connaître les différentes techniques de chromatographie pour la purification des protéines
- Etre capable de choisir et de mettre en œuvre la (les) méthode(s) appropriée(s) pour la purification de protéines d'intérêt
- Savoir utiliser des automates pour la purification des protéines
- Savoir analyser la qualité et doser les protéines purifiées

PUBLIC

Techniciens, ingénieurs, chercheurs souhaitant surproduire des protéines en vue d'études biochimiques, biophysiques et/ou structurales

PRÉREQUIS

Connaissances de base en biochimie des protéines
Les moins initiés pourront suivre les stages " Techniques de clonage d'ADN par restriction et par recombinaison homologue " (Réf. 17212, ce catalogue) et/ou le stage "Du gène à la protéine" (Réf. 17133, ce catalogue) avant de participer à ce stage.

PROGRAMME

Cours (7 h)
- Introduction sur les caractéristiques physico-chimiques des protéines
- Lyse bactérienne : méthodes et choix du tampon
- Purification des protéines : principes et méthodes

Travaux pratiques (18 h)

- Purification d'une protéine recombinante à partir d'un culot bactérien par 2 stratégies différentes
- Suivi de la purification par gel de polyacrylamide en conditions dénaturantes (SDS-PAGE)
- Dosage de la protéine purifiée par la méthode de Bradford, par spectrométries UV et infra-rouge

EQUIPEMENT

4 AKTA, Direct Detect, Cary 50

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