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La cytométrie en flux

RESPONSABLE

Julie CAZARETH

Ingénieure d'études

UMR 7275

LIEU

VALBONNE (06)

ORGANISATION

3 jours
De 4 à 8 stagiaires
TP en sous-groupes de 4 stagiaires maximum avec 1 intervenant par sous-groupe

COÛT PÉDAGOGIQUE

1050 Euros

A L'ISSUE DE LA FORMATION

Evaluation de la formation par les stagiaires
Envoi d'une attestation de formation

DATES DU STAGE

18179 : du mardi 25/09/2018 au jeudi 27/09/2018

18411 : du mercredi 05/12/2018 au vendredi 07/12/2018

Janvier Février Mars Avril
Mai Juin Juillet Août
Sept.
18179
Oct. Nov. Déc.
18411

OBJECTIF

- Acquérir, par une alternance de cours et de travaux pratiques, les principes et la méthodologie pratique de la cytométrie en flux

PUBLICS

Chercheurs, ingénieurs et techniciens de tout domaine de recherche
Afin d'adapter au mieux le contenu de la formation aux applications des participants, il leur sera demandé de compléter et renvoyer un questionnaire téléchargeable ICI avant le début de la formation.

PRÉREQUIS

Aucun : accessible aux débutants et utilisateurs réguliers

PROGRAMME

Cours (10 h)
- Principes généraux de la cytométrie et fonctionnement (fluidique, optique, détection)
- Fluorescence et fluorochromes employés en cytométrie
- Méthodes de préparation des échantillons et mise au point expérimentale (choix et combinaison des sondes, échantillons contrôles...)
- Réglages (détecteurs et seuils), compensations, interfaces logicielles
- Notions de tri cellulaire
- Applications : phénotypage de surface et intracellulaire, FRET, mort cellulaire...
- Information sur les nouveaux développements en cytométrie
- Hygiène et sécurité autour de la cytométrie
Travaux pratiques (9 h)
- Réglages manuels du cytomètre : détecteurs, seuils, compensations
- Stratégie d'analyse : exclusion des doublets, stratégie de fenêtrage et création de la page d'analyse
- Phénotypage cellulaire par multi-marquages
- Analyse du cycle cellulaire
- Analyse de l'apoptose (potentiel membranaire mitochondrial, marquage à l'Annexin V)
- Mesure de FRET
- Analyse de données avec logiciel libre et/ou constructeur (FACSDiva, CyFlogic, Kaluza...)

EQUIPEMENT

- Analyseurs et trieurs de BD Biosciences (FACSAria III, LSR II Fortessa) ; analyseur spectral de SONY (SP6800) ; cytomètre de prêt selon besoins des stagiaires (Miltenyi Biotec, Partec, Accuri, Guava...)

INTERVENANTS

J. Cazareth (ingénieure), E. Lalli (chercheur) et F. Larbret (ingénieur, C3M, Nice)
Cette formation a le label de l'association française de cytométrie (AFC)
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