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La cytométrie en flux

RESPONSABLE

Julie CAZARETH

Ingénieure d'études

UMR 7275

LIEU

VALBONNE (06)

ORGANISATION

3,5 jours
De 4 à 8 stagiaires
TP en sous-groupes de 4 stagiaires maximum avec 1 intervenant par sous-groupe

COÛT PÉDAGOGIQUE

1300 Euros

A L'ISSUE DE LA FORMATION

Evaluation de la formation par les stagiaires
Envoi d'une attestation de formation

DATE DU STAGE

19166 : du mardi 08/10/2019 au vendredi 11/10/2019

Janvier Février Mars Avril
Mai Juin Juillet Août
Sept. Oct.
19166
Nov. Déc.

OBJECTIF

- Acquérir, par une alternance de cours et de travaux pratiques, les principes et la méthodologie pratique de la cytométrie en flux

PUBLICS

Chercheurs, ingénieurs et techniciens de tout domaine de recherche
NB : l'analyse spécifique des microorganismes (bactéries, levures, plancton?) ne sera pas traitée dans cette formation et fera l'objet d'une formation dédiée (Réf. 19345, ce catalogue)

Afin d'adapter le contenu du stage aux attentes des stagiaires, un questionnaire téléchargeable ICI devra être complété et renvoyé au moment de l'inscription.

PRÉREQUIS

Aucun : accessible aux débutants et utilisateurs réguliers

PROGRAMME

Cours (12 h)
- Principes généraux de la cytométrie et fonctionnement (fluidique, optique, détection)
- Fluorescence et fluorochromes employés en cytométrie
- Méthodes de préparation des échantillons et mise au point expérimentale (choix et combinaison des sondes, échantillons contrôles...)
- Réglages (détecteurs et seuils), compensations, interfaces logicielles
- Notions de tri cellulaire
- Applications : phénotypage de surface et intracellulaire, cycle cellulaire, mort cellulaire, apoptose...
- Information sur les nouveaux développements en cytométrie
- Hygiène et sécurité autour de la cytométrie
Travaux pratiques (9 h)
- Réglages manuels du cytomètre : détecteurs, seuils, compensations
- Stratégie d'analyse : exclusion des doublets, stratégie de fenêtrage et création de la page d'analyse
- Immuno-phénotypage par marquages multi-couleurs
- Analyse du cycle cellulaire
- Analyse de l'apoptose (activité caspase, potentiel membranaire mitochondrial, marquage à l'Annexin V)
- Analyse de données avec logiciel libre et/ou constructeur (FACSDiva, Flow Jo, Kaluza...)
Programme détaillé téléchargeable ICI.

EQUIPEMENT

Analyseurs et trieurs de BD Biosciences (FACSAria III, LSR II Fortessa) ; analyseur spectral de SONY (SP6800) ; cytomètre de prêt selon besoins des stagiaires (Miltenyi Biotec, Partec, Accuri, Guava, Beckman Coulter, Ozyme)

INTERVENANTS

J. Cazareth (ingénieure d'études) et F. Larbret (ingénieur, C3M, Nice)
Cette formation a le label de l'association française de cytométrie (AFC)

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