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La culture de lignées cellulaires : obtention, manipulation, contrôle qualité, conservation, traçabilité

Environnement scientifique et technique de la formation

Institut NeuroMyoGène - UMR 5310

RESPONSABLE

Isabelle GROSJEAN

Ingénieure d'études

UMR 5310

LIEU

LYON (69)

ORGANISATION

2 jours
De 2 à 4 stagiaires

COÛT PÉDAGOGIQUE

1100 Euros

A L'ISSUE DE LA FORMATION

Evaluation de la formation par les stagiaires
Envoi d'une attestation de formation

DATES DU STAGE

19172 : du mercredi 13/03/2019 au jeudi 14/03/2019

19223 : du mardi 26/11/2019 au mercredi 27/11/2019

19426 : du mardi 03/12/2019 au mercredi 04/12/2019

Janvier Février Mars
19172
Avril
Mai Juin Juillet Août
Sept. Oct. Nov.
19223
Déc.
19426

OBJECTIFS

- Maîtriser la pratique de la culture des lignées cellulaires en suivant les règles de bonnes pratiques et de sécurité
- Savoir mettre en pratique l'organisation du travail et acquérir les bons gestes
- Etre capable de mesurer l'importance de la conservation des lignées sur le long terme, de la traçabilité et du contrôle qualité
- Appréhender la diversité des lignées existantes, connaître les applications potentielles

PUBLICS

Scientifiques, ingénieurs et techniciens voulant maîtriser la culture de lignées cellulaires
Personnels amenés à former d'autres utilisateurs de lignées cellulaires

Afin d'adapter le contenu du stage aux attentes des stagiaires, un questionnaire téléchargeable ICI devra être complété et renvoyé au moment de l'inscription.

Prérequis : aucun

PROGRAMME

Cours (les 2 matinées)
- Introduction sur la culture de lignées cellulaires humaines et animales
- Présentation des lignées cellulaires continues :
. les grandes catégories de lignées et exemples d'utilisation
. la notion de passage : courbe de croissance, numération, temps de doublement
. obtenir une lignée cellulaire : banque de référence, société commerciale, fabrication
- Conservation des lignées cellulaires :
. la congélation : paramètres, protocole, gestion des lots de congélation
. la décongélation : dangers liés à l'utilisation de l'azote, les protocoles de décongélation
. les données associées et la traçabilité
- Le problème des contaminations : cas particulier des mycoplasmes et prévention des contaminations (voir le stage Réf. 18184 / 19212 dédié aux contaminations dans les cultures)
- Utilisation des équipements et matériels : la notion d'évaluation du risque
- Conclusion sur les " Bonnes pratiques " en culture cellulaire

Travaux pratiques (les 2 après-midis)
- Observation au microscope de lignées en culture
- Comptage des cellules, viabilité, passage, congélation et décongélation
- Test de détection des mycoplasmes en luminescence
- Clonage cellulaire en dilution limite
Chaque stagiaire manipulera 3 lignées cellulaires en culture et 1 lignée cellulaire congelée.

Ce stage peut être poursuivi par une journée complémentaire dédiée aux bonnes pratiques de culture de lignées cellulaires (Réf. 19173, ce catalogue).

EQUIPEMENT

Laboratoire L2 : PSM, incubateurs, microscope, centrifugeuse, congélateurs et cryo-conservateur

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