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De la biologie moléculaire au génie génétique : théorie et pratique

Environnement scientifique et technique de la formation

Laboratoire de biologie moléculaire eucaryote - UMR 5099

RESPONSABLE

Kamila BELHABICH-BAUMAS

Ingénieure d'études

UMR 5099

LIEU

TOULOUSE (31)

ORGANISATION

5 jours
De 4 à 9 stagiaires
TP en sous-groupes de 5 stagiaires maximum avec 1 intervenant par sous-groupe

COÛT PÉDAGOGIQUE

1800 Euros

A L'ISSUE DE LA FORMATION

Evaluation de la formation par les stagiaires
Envoi d'une attestation de formation

DATE DU STAGE

20215 : du lundi 11/05/2020 au vendredi 15/05/2020

Janvier Février Mars Avril
Mai
20215
Juin Juillet Août
Sept. Oct. Nov. Déc.

OBJECTIFS

- Acquérir les bases de la biologie moléculaire : distinction entre transcription et traduction d'un ARNm
- Acquérir les bases du génie génétique : techniques de clonage, distinction entre sélection et identification de clones recombinants
- Mettre en œuvre les techniques de biologie moléculaire : extraction d'ADN, purification, amplification PCR, digestion rapide par les enzymes de restriction Fastdigest, analyse par électrophorèse, clonage (ligation rapide par l'enzyme FastLigate), électroporation, sélection et identification des clones recombinants

PUBLIC

Ingénieurs, chercheurs et techniciens en biologie, pharmacologie, chimie et/ou biophysique

PRÉREQUIS

Notions de biologie moléculaire

PROGRAMME

Cours (17,5 h)
- De la cellule au gène : transfert de l'information génétique (transcription, distinction entre le brin codant et le brin non codant de l'ADN, traduction)
- Le génie génétique :
. les différents types de polymérases dont celles utilisées pour réaliser les différents types de PCR, détails sur les techniques de PCR, enzymes de restriction, enzymes de modification
. les vecteurs de clonages eucaryotes et procaryotes : choix du vecteur (plasmide, virus, phage)
. choix de la méthode d'injection de l'ADN étranger dans la cellule hôte : transformation, transduction, conjugaison, transfection, choix des cellules hôtes
. méthodes de détection et d'analyse des clones recombinants

Travaux pratiques et dirigés (17,5 h)
- Clonage d'un gène eucaryote dans un vecteur eucaryote / procaryote et transformation dans une cellule procaryote :
. amplification par PCR d'un gène eucaryote, électrophorèse et visualisation sur gel d'agarose
. purification sur colonne
. préparation du vecteur : extraction et purification à partir d'une culture cellulaire, digestion enzymatique, ligature avec l'ADN étranger et introduction dans les cellules hôtes
. sélection sur milieu sélectif et identification par PCR sur colonies de clones recombinants
. confirmation par analyse moléculaire des clones recombinants (extraction des plasmides recombinants, analyse par les enzymes de restriction et amplification par PCR de l'ADN étranger, électrophorèse)

INTERVENANTS

K. Belhabich-Baumas (ingénieure) et L. Hellaudais (technicienne)

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