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Hybridation in situ : principes et méthodes

Environnement scientifique et technique de la formation

Institut des neurosciences Paris-Saclay - UMR 9197

RESPONSABLES

Aurélie HEUZE

Ingénieure d'études

UMR 9197

Maryline BLIN

Ingénieure d'études

UMR 9197

LIEU

GIF-SUR-YVETTE (91)

ORGANISATION

3 jours
De 4 à 6 stagiaires
TP encadrés par 2 intervenants à partir de 5 stagiaires

COÛT PÉDAGOGIQUE

1250 Euros

A L'ISSUE DE LA FORMATION

Evaluation de la formation par les stagiaires
Envoi d'une attestation de formation

DATE DU STAGE

20223 : du mercredi 18/11/2020 au vendredi 20/11/2020

Janvier Février Mars Avril
Mai Juin Juillet Août
Sept. Oct. Nov.
20223
Déc.

OBJECTIFS

- Connaître le principe de l'hybridation in situ (HIS)
- Savoir préparer les échantillons pour l'hybridation in situ
- Savoir préparer les sondes pour l'hybridation in situ
- Maîtriser les méthodologies d'HIS et de FISH (hybridation in situ en fluorescence)

PUBLICS

Techniciens, ingénieurs, chercheurs

Afin d'adapter le contenu du stage aux attentes des stagiaires, un questionnaire téléchargeable ICI devra être complété et renvoyé au moment de l'inscription.

PRÉREQUIS

Notions de base en biologie moléculaire

PROGRAMME

Cours théoriques (5 h)
- Préparation des échantillons
- Synthèse de sondes ARN - ribosondes
- Hybridation in situ : les grandes étapes
- Différentes méthodes de révélation en simple et double marquage

Travaux dirigés (14 h)
- Préparation de sondes
- Hybridation sur embryons entiers de poisson-zèbre avec deux méthodes : manuelle et robotisée
- Révélation du patron d'expression par colorimétrie et fluorescence
- Observation du résultat sous loupe binoculaire et par microscopie confocale

Pendant la formation, du temps sera consacré à des discussions autour des problèmes rencontrés par les stagiaires qui pratiquent déjà la technique afin de leur proposer des solutions adaptées.

EQUIPEMENT

Station automatisée pour l'hybridation in situ InsituPro (Intavis)

INTERVENANTS

A. Heuzé et M. Blin (ingénieures d'études)

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