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Histologie : de la préparation d'échantillons à la validation des marquages par analyse d'image

Environnement scientifique et technique de la formation

SFR Santé François Bonamy

- UMS 3536
RESPONSABLES

Philippe HULIN

Ingénieur d'études

UMS 3536

Perrine PAUL-GILLOTEAUX

Ingénieure de recherche

UMS 3536

LIEU

NANTES (44)

ORGANISATION

4 jours
De 8 à 16 stagiaires

MÉTHODES PÉDAGOGIQUES

- Alternance de cours et tables rondes (40 %) et de travaux pratiques (60 %)
- TP en sous-groupes de 4 stagiaires maximum avec 2 intervenants par sous-groupe

COÛT PÉDAGOGIQUE

1800 Euros

A L'ISSUE DE LA FORMATION

Evaluation de la formation par les stagiaires
Envoi d'une attestation de formation

DATE DU STAGE

21290 : du lundi 22/03/2021 au jeudi 25/03/2021

2021
Janvier Février Mars
21290
Avril
Mai Juin Juillet Août
Sept Oct Nov Déc
NOUVEAU
OBJECTIFS
-

Acquérir des bases théoriques et pratiques sur la préparation des échantillons pour la microscopie photonique (lumière visible et fluorescence) et la quantification du signal


-

Savoir préparer un échantillon en histologie (coloration ? immuno-marquage)


-

Connaître les différents types de préparation en fonction de la question biologique posée


-

Savoir adapter la préparation des échantillons pour une analyse du signal solide et reproductible


-

Savoir reconnaitre les artefacts de préparation les plus courants et savoir vérifier la qualité de ses marquages à l'aide de logiciels d'analyse d'image

PUBLICS
Chercheurs, ingénieurs, techniciens en santé / biologie
Prérequis : avoir une expérience en microscopie photonique (fond clair et/ou fluorescence)
PROGRAMME
La formation portera sur les préparations des échantillons pour la microscopie (de la prise en charge de l'échantillon jusqu'à la coupe sur lame) et les méthodes de vérification de la qualité des échantillons préparés en vue de leur quantification par analyse d'image. Les caractéristiques de préparation de différents types d'échantillons seront présentées (tissus durs - os -, biopsie, organe entier...) et mises en pratique.
Cours et tables rondes (40 %)
- Préparation des coupes :
. détails des étapes de préparation des coupes histologiques paraffine et congelées
. présentation des diverses colorations, des protocoles, de cas d'écoles et d'erreurs typiques à éviter
- Immuno-marquages :
. préparations en immuno-histochimie sur coupe (DAB - Red chromogène...)
. éléments de traitement du signal et d'analyse d'image pour validation de la bonne préparation des échantillons
. aspects quantitatifs
. immunofluorescence - multiplexing
- Introduction à la préparation des gros échantillons : spécificités liées aux marquages et à la préparation des gros échantillons pour observation en microscopie
Travaux pratiques (60 %)
- Préparation des échantillons histologiques (mise en œuvre des protocoles présentés)
- Visualisation au microscope des échantillons préparés
- Acquisition et analyse des images dans les meilleures conditions (logiciels gratuits QuPath et ImageJ)
Possibilité de faire les TP, à des fins pédagogiques, sur des échantillons apportés par les stagiaires.
EQUIPEMENTS
Microtomes ; cryostat ; automate de coloration ; serial block face ; scanner de lame (fond et fluorescence) ; microscope champ large et confocal ; ordinateurs avec QuPath et ImageJ
Voir le site internet de la plateforme MicroPICell pour une description détaillée des équipements
INTERVENANTS
S. Blandin, J. Lesoeur (assistantes ingénieures), L. Dubreil, M. Feyeux , P. Hulin,
S. Nedellec (ingénieurs d'études), M. Malloci et P. Paul-Gilloteaux (ingénieures de recherche)
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